secretion systems,T6SS)廣泛存在于革蘭陰性菌中,其效應(yīng)蛋白Tsel在細(xì)菌種間競爭中發(fā)揮著重要的作用。本研究旨在探究Tsel對金黃色葡萄球菌(Staphylococcu saureus,S.aureus)的抑菌作用,探索其在耐藥性細(xì)菌中的表現(xiàn)和影響。利用含有重組質(zhì)粒pET- 28a -Tsel的大腸桿菌原核表達(dá)系統(tǒng)誘導(dǎo)Tsel蛋白表達(dá)并純化。通過熒光顯微鏡及掃描電鏡觀察重組蛋白Tsel對金黃色葡萄球菌細(xì)胞壁的破壞作用。最后,采用瓊脂孔擴(kuò)散抑菌試驗(yàn)、微量肉湯稀釋法測定重組蛋白Tse1對金黃色葡萄球菌的抗菌活性及其與抗生素聯(lián)合作用的效果。結(jié)果表明,在 16<sup>°</sup>C ,IPTG濃度為 0.5mmol?L<sup>-1</sup> 誘導(dǎo) <sup>16h</sup> 時,Tse1蛋白的表達(dá)量達(dá)到最高并以可溶性形式存在于上清液中,蛋白相對分子質(zhì)量約為 <img src="/qkimages/bbd6/bbd6202506/bbd620250634-2-l.jpg" with="40px" style="vertical-align: middle;"> 。重組蛋白Tse1與 s .aureus共培后可發(fā)現(xiàn)蛋白結(jié)合在菌體表面并能破壞其細(xì)胞壁,破壞程度表現(xiàn)為劑量依賴形式。瓊脂孔擴(kuò)散抑菌試驗(yàn)表明重組蛋白Tsel對 S.aureus 不同菌株均有明顯抑菌作用,并且與青霉素(PG)聯(lián)合使用能明顯提升Tse1蛋白的抑菌效果。本試驗(yàn)建立了Tsel蛋白的原核表達(dá)及純化方法,證明了Tsel蛋白對金黃色葡萄球菌具有抑菌作用,與青霉素聯(lián)合應(yīng)用能增強(qiáng)其抑菌效果,為挖掘新型抗生素替代品提供了相關(guān)理論基礎(chǔ)。-龍?jiān)雌诳W(wǎng)" />

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T6SS效應(yīng)蛋白Tse1的原核表達(dá)及其對金黃色葡萄球菌的抑菌作用

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中圖分類號:S859.799.1 文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A 文章編號:0366-6964(2025)06-2917-10

Prokaryotic Expression of the T6SS Effector Protein Tsel and Its inhibitory Effect on Staphylo(剩余17900字)

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