刺葡萄類鈣調(diào)蛋白基因VdCML8克隆與表達分析及其啟動子轉(zhuǎn)錄活性測定

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摘要：【目的】克隆刺葡萄類鈣調(diào)蛋白基因VdCML8基因及其啟動子序列，并對VdCML8基因進行表達分析，對其啟動子進行轉(zhuǎn)錄活性測定，為深入探究該基因在葡萄抗炭疽病中的生物學(xué)功能提供理論參考。【方法】以刺葡萄紫秋為材料，采用RT-PCR技術(shù)克隆VdCML8基因及其啟動子序列，對VdCML8蛋白的理化性質(zhì)和二級結(jié)構(gòu)進行生物信息學(xué)分析，并采用實時熒光定量PCR檢測刺葡萄紫秋和歐洲葡萄紅地球CML8基因在接種膠孢炭疽菌及外施水楊酸（SA）和茉莉酸（JA）處理后的表達特征，通過構(gòu)建β-葡萄糖苷酶（GUS）融合載體轉(zhuǎn)化煙草進行轉(zhuǎn)錄活性檢測。（剩余26138字）