穩(wěn)轉oHSV2主要衣殼蛋白VP5人宮頸癌細胞系的構建

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［摘 要］ 為建立穩(wěn)定表達溶瘤Ⅱ型單純皰疹病毒主要衣殼蛋白（VP5）的人子宮頸癌HeLa-VP5細胞系，探究VP5蛋白是否調控自然殺傷細胞（NK）的細胞毒性。運用piggyBac轉座系統(tǒng)，通過lipofectamine 3000TM 脂質體轉染法，將 pPBDP-UL19和pSPBT質粒轉入HeLa細胞，利用嘌呤霉素（Puro）篩選穩(wěn)定細胞株，用有限稀釋法得到單克隆細胞，利用western blot鑒定HeLa-VP5細胞系中VP5蛋白的表達，以及利用流式細胞術檢測HeLa-VP5中GFP的表達，最后實時監(jiān)測法比較改造前后細胞系的生長活性變化。（剩余13402字）