基于VIGS的不同表達(dá)載體混合接種對烤煙煙堿代謝的影響

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摘要：煙堿的代謝具有復(fù)雜的基因調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，其中眾多基因間存在相互影響，為探究不同基因共同沉默后對煙堿代謝通路以及葉片煙堿含量的影響。使用前期構(gòu)建的煙堿代謝途徑中3個功能基因（NtA622、NtPMT、NtBBL）和1個調(diào)控基因（NtMYB305a）病毒載體，利用病毒誘導(dǎo)基因沉默（virus induced gene silencing，VIGS）技術(shù)依據(jù)基因在煙堿代謝中的作用性質(zhì)和作用階段，設(shè)置不同載體組合浸染液接種處理，測定各處理的基因相對表達(dá)量、酶活性、煙堿含量，系統(tǒng)分析目的基因沉默效率以及沉默后對其他基因表達(dá)的影響，并探究各處理的基因平均沉默效率對煙堿降低率的貢獻(xiàn)度。（剩余12523字）