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經(jīng)典和重組兔黏液瘤病毒TaqMan探針熒光定量PCR檢測(cè)方法的建立和應(yīng)用

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摘要:根據(jù)GenBank已登錄的經(jīng)典兔黏液瘤病毒(MYXV)和重組兔黏液瘤病毒(ha-MYXV)基因保守序列設(shè)計(jì)特異性引物和TaqMan探針,建立能同時(shí)檢出ha-MYXV和MYXV病原的快速、簡(jiǎn)單且敏感性較高的TaqMan探針熒光定量PCR臨床檢測(cè)方法。結(jié)果顯示,稀釋度為1×107~1×103 拷貝/μL標(biāo)準(zhǔn)品建立的標(biāo)準(zhǔn)曲線具有良好的線性關(guān)系,相關(guān)系數(shù)為1.00;該方法對(duì)MYXV和ha-MYXV具有高度特異性,與綠膿桿菌、兔多殺性巴氏桿菌、沙門氏菌、兔出血癥病毒1型、兔出血癥病毒2型等其他病原間無(wú)交叉反應(yīng);檢測(cè)靈敏度可達(dá)1×102 拷貝/μL;組內(nèi)和組間變異系數(shù)在0.05%~1.19%間。(剩余8596字)

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