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豆類活性肽PA1b在大腸桿菌中的多拷貝串聯(lián)表達

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摘要:為構(gòu)建能表達串聯(lián)豆類活性肽PA1b(pea albumin 1 subunit b)基因的重組大腸桿菌,并進行誘導(dǎo)表達和產(chǎn)物純化。通過合成PA1b基因,采用同尾酶技術(shù)構(gòu)建1~4拷貝數(shù)的串聯(lián)PA1b基因,分別克隆至pET32a(+)原核表達載體上,轉(zhuǎn)化入大腸桿菌BL21(DE3)中進行誘導(dǎo)表達,親和層析純化融合蛋白,腸激酶切除融合標(biāo)簽和切開串聯(lián)體,獲得單體PA1b肽。(剩余8248字)

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