豬急性腹瀉綜合征冠狀病毒N蛋白間接ELISA抗體檢測(cè)方法的建立及初步應(yīng)用

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摘 要： 為建立一種豬急性腹瀉綜合征冠狀病毒（SADS-CoV）血清抗體的快速檢測(cè)方法，本研究首先經(jīng)PCR擴(kuò)增SADS-CoV N基因，純化鑒定后克隆至表達(dá)載體pET-32a（+），構(gòu)建重組質(zhì)粒pET-32a-N。重組N蛋白誘導(dǎo)表達(dá)并通過(guò)SDS-PAGE和Western blot鑒定后，采用純化的重組N蛋白作為包被抗原，以兔抗豬HRP- IgG作為二抗，利用方陣滴定法優(yōu)化各反應(yīng)條件，建立了一種以SADS-CoV N蛋白為靶標(biāo)的檢測(cè)SADS-CoV血清抗體的間接ELISA方法，并對(duì)此方法的敏感性、特異性、重復(fù)性及臨床應(yīng)用價(jià)值進(jìn)行鑒定。（剩余16107字）