雞chNHE1精準(zhǔn)基因編輯細(xì)胞系的構(gòu)建及其抗ALV-J感染的研究

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摘 要： 旨在構(gòu)建ALV-J受體分子chNHE1精準(zhǔn)基因編輯細(xì)胞系，本研究利用熒光標(biāo)記的CRISPR/Cas9系統(tǒng)，在DF-1細(xì)胞中將chNHE1介導(dǎo)ALV-J進(jìn)入宿主細(xì)胞的關(guān)鍵氨基酸V33進(jìn)行突變，W38進(jìn)行缺失，同時將編碼第34-37位氨基酸的密碼子同義替換。通過流式細(xì)胞分選獲得48株單克隆細(xì)胞系，PCR及測序分析結(jié)果顯示，其中有14株單克隆細(xì)胞系的chNHE1成功發(fā)生V33突變、W38缺失以及34-37位氨基酸的密碼子同義替換，基因編輯效率為29%。（剩余16254字）