四聯(lián)鱟抗菌肽Tachyplesin Ⅱ畢赤酵母重組質(zhì)粒構(gòu)建及其表達(dá)

打開文本圖片集

摘  要：利用重組畢赤酵母表達(dá)四聯(lián)鱟抗菌肽Tachyplesin Ⅱ以實(shí)現(xiàn)高效制備。根據(jù)鱟抗菌肽Tachyplesin Ⅱ的氨基酸序列，以及胰彈性蛋白酶和羧肽酶A的特異性裂解位點(diǎn)，設(shè)計(jì)四聯(lián)鱟抗菌肽（4TpⅡ）序列，按照畢赤酵母密碼子偏好性進(jìn)行優(yōu)化，經(jīng)EcoR Ⅰ和Not Ⅰ雙酶切后構(gòu)建重組質(zhì)粒pPICZαA-4TpⅡ，電轉(zhuǎn)至畢赤酵母X-33，利用Zeocin抗性篩選陽性轉(zhuǎn)化子，經(jīng)甲醇誘導(dǎo)表達(dá)后SDS-PAGE分析。（剩余7148字）