薯蕷皂苷元通過上調胃癌EMT抑制肽表達抑制胃癌細胞的增殖和侵襲

打開文本圖片集

［摘要］  目的： 探討薯蕷皂苷元（Diosgenin）對胃癌細胞增殖和侵襲的影響及潛在的機制。方法： 選擇胃癌MKN-28和BGC-823細胞，分為對照組（常規(guī)培養(yǎng)）、溶媒組（培養(yǎng)基中加入與薯蕷皂苷元組等體積的乙醇）和薯蕷皂苷元組（培養(yǎng)基中分別加入終濃度為0.5、2和8 μg/mL薯蕷皂苷元），采用實時熒光定量PCR（qRT-PCR）檢測各組細胞胃癌EMT抑制肽（inhibitory gastric cancer EMT-related peptide，IGCE）相對表達量；另將胃癌細胞分為對照組（常規(guī)培養(yǎng)）、Lv-control組（培養(yǎng)基中加入重組慢病毒Lv-control）、Lv-IGCE組（培養(yǎng)基中加入重組慢病毒Lv-IGCE），病毒感染72 h，采用CCK-8檢測細胞增殖活性，Trans-well法檢測細胞侵襲能力；再將胃癌MKN-28和BGC-823細胞分為對照組（常規(guī)培養(yǎng)）、轉染組（細胞轉染pcDNA-IGCE-aa-GFP），轉染48 h，顯微鏡下觀察綠色熒光蛋白（GFP）表達；選用pcDNA-IGCE-aa-GFP轉染后的MKN-28細胞分為對照組（常規(guī)培養(yǎng)）、溶媒組（培養(yǎng)基中加入與薯蕷皂苷元組等體積的乙醇）、不同濃度薯蕷皂苷元組（培養(yǎng)基中分別加入終濃度為0.5、2和8 μg/mL薯蕷皂苷元），共孵育48 h，采用蛋白印跡檢測融合蛋白IGCE-aa-GFP表達；將胃癌MKN-28細胞分為對照組（常規(guī)培養(yǎng)）、Lv-IGCE-smORF組（培養(yǎng)基中加入慢病毒Lv-IGCE-smORF），病毒感染48 h，再經放線菌酮處理不同時間，分別于0、0.5、1、2、4和8 h采用蛋白免疫印跡檢測Krüppel樣因子4（KLF4）蛋白表達。（剩余15880字）