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摘 要: 利用同源重組技術及Cre-LoxP系統(tǒng)平臺,構(gòu)建牛結(jié)節(jié)性皮膚病病毒(lumpy skin disease virus, LSDV)缺失TK基因毒株,為研制出安全、高效的LSDV基因工程疫苗提供備選毒株。以TK基因為靶基因,利用Cre-LoxP系統(tǒng)平臺,紅色熒光蛋白(RFP)為篩選標記,采用重疊PCR方法擴增左、右同源臂以及RFP基因表達框并進行融合,將其克隆至pUC19T載體,構(gòu)建基因缺失轉(zhuǎn)移載體pUC19T-LSDV-ΔTK-RFP。(剩余17490字)
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應用Cre-LoxP系統(tǒng)構(gòu)建牛結(jié)節(jié)性皮膚病病毒缺失TK基因毒株
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