穩(wěn)定表達(dá)PRRSV M蛋白的MARC-145ORF6細(xì)胞系的構(gòu)建及其對(duì)PRRSV增殖的影響

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摘 要： 為了給深入研究豬繁殖與呼吸綜合征病毒（porcine reproductive and respiratory syndrome virus， PRRSV）ORF6基因編碼的M蛋白的生物學(xué)功能提供重要試驗(yàn)材料，本研究首先利用慢病毒包裝系統(tǒng)構(gòu)建了過(guò)表達(dá)PRRSV ORF6基因的重組慢病毒質(zhì)粒，將該質(zhì)粒連同輔助質(zhì)粒共同轉(zhuǎn)染至HEK293T細(xì)胞獲得重組慢病毒；之后將重組慢病毒感染MARC-145細(xì)胞，利用嘌呤霉素結(jié)合有限稀釋法進(jìn)行篩選，連續(xù)篩選3輪后建立了穩(wěn)定表達(dá)PRRSV M蛋白的MARC-145ORF6細(xì)胞系；并使用CCK-8試驗(yàn)評(píng)估過(guò)表達(dá)PRRSV M蛋白對(duì)MARC-145細(xì)胞生長(zhǎng)的影響。（剩余17979字）