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基于CRISPR/Cas9技術(shù)的SS18-SSX1陽(yáng)性細(xì)胞模型的構(gòu)建與驗(yàn)證

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摘要：目的 利用CRISPR/Cas9技術(shù)構(gòu)建并驗(yàn)證SS18-SSX1+-HEK293T細(xì)胞模型。方法 靶向SS18和SSX1分別設(shè)計(jì)sgRNA，構(gòu)建Lentivirus-CRISPR v2-SS18-gRNA-SSX1-gRNA-EGFP一體化慢病毒載體，通過(guò)慢病毒轉(zhuǎn)染和熒光流式分選技術(shù)篩選轉(zhuǎn)入載體的HEK293T多克隆細(xì)胞，在多克隆細(xì)胞的基礎(chǔ)上挑選SS18-SSX1陽(yáng)性的單克隆細(xì)胞株，通過(guò)RT-PCR、Sanger測(cè)序和Western Blot驗(yàn)證SS18-SSX1+-HEK293T單克隆細(xì)胞系構(gòu)建成功。（剩余14310字）

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