Yes 相關(guān)蛋白對(duì)人宮頸癌SiHa 細(xì)胞生物學(xué)行為的影響

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［摘 要］ 目的：探討Yes相關(guān)蛋白（YAP）沉默對(duì)人宮頸癌（CC）SiHa細(xì)胞增殖、遷移和侵襲能力的影響。方法：對(duì)人CC細(xì)胞株SiHa細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng)，慢病毒YAPshRNA轉(zhuǎn)染到SiHa細(xì)胞，建立穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的YAP-shRNA 實(shí)驗(yàn)組（sh-YAP 組） 和空載質(zhì)粒對(duì)照組（對(duì)照組），采用Western blotting 法檢測(cè)YAP 沉默效果；免疫熒光法檢測(cè)2 組細(xì)胞中肌動(dòng)蛋白（F-actin） 微絲數(shù)量及形態(tài)變化；CCK-8 法、Transwell 小室實(shí)驗(yàn)和細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)2 組細(xì)胞存活率、遷移及侵襲細(xì)胞數(shù)以及細(xì)胞劃痕愈合率；Western blotting 法檢測(cè)2 組細(xì)胞中上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT） 相關(guān)標(biāo)記物［E 鈣黏蛋白（E-cadherin） 和鋅指轉(zhuǎn)錄因子（Snail）］、DNA 損傷修復(fù)相關(guān)蛋白γ （γ-H2AX） 和凋亡相關(guān)蛋白［c-MYC 和B 細(xì)胞淋巴瘤2（ Bcl-2）］ 蛋白表達(dá)水平。（剩余11503字）