PRDM5 過表達慢病毒載體的構(gòu)建及穩(wěn)定轉(zhuǎn)染Neuro-2a細胞的建立

打開文本圖片集

［摘 要］ 目的：構(gòu)建 PR鋅指區(qū)域蛋白 （PRDM） 5基因的過表達慢病毒載體，建立穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的小鼠神經(jīng)瘤母細胞Neuro-2a， 為探討PRDM5 在缺血性腦卒中（IS） 發(fā)病機制中的作用奠定基礎(chǔ)。方法：在NCBI上搜索PRDM5的序列并設(shè)計引物，PCR法擴增獲取PRDM5基因序列，將其與BamHⅠ和AgeⅠ限制性內(nèi)切酶雙酶切后的慢病毒載體GV492 進行連接，構(gòu)建GV492-PRDM5 過表達重組質(zhì)粒，采用PCR 法篩選并鑒定出的與目的基因片段長度相近的陽性克隆送生工生物工程（上海） 股份有限公司測序。（剩余12780字）