PRDM5 過表達(dá)慢病毒載體的構(gòu)建及穩(wěn)定轉(zhuǎn)染Neuro-2a細(xì)胞的建立

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［摘 要］ 目的：構(gòu)建 PR鋅指區(qū)域蛋白 （PRDM） 5基因的過表達(dá)慢病毒載體，建立穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的小鼠神經(jīng)瘤母細(xì)胞Neuro-2a， 為探討PRDM5 在缺血性腦卒中（IS） 發(fā)病機(jī)制中的作用奠定基礎(chǔ)。方法：在NCBI上搜索PRDM5的序列并設(shè)計(jì)引物，PCR法擴(kuò)增獲取PRDM5基因序列，將其與BamHⅠ和AgeⅠ限制性內(nèi)切酶雙酶切后的慢病毒載體GV492 進(jìn)行連接，構(gòu)建GV492-PRDM5 過表達(dá)重組質(zhì)粒，采用PCR 法篩選并鑒定出的與目的基因片段長(zhǎng)度相近的陽性克隆送生工生物工程（上海） 股份有限公司測(cè)序。（剩余12780字）