腦心肌炎病毒VP2 2A基因真核表達(dá)載體的構(gòu)建

打開文本圖片集

摘要：為構(gòu)建腦心肌炎病毒VP2 2A基因真核表達(dá)載體。參考EMCV毒株基因組序列，設(shè)計VP2 2A基因特異性引物，PCR擴(kuò)增VP2 2A基因目的片段，雙酶切目的基因和pcDNA3.1-Flag質(zhì)粒產(chǎn)生相同的黏性末端，使用T4 DNA連接酶連接相同的黏性末端，連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化至DH5α感受態(tài)細(xì)胞，菌液PCR鑒定陽性單克隆菌落，對陽性單克隆提取重組質(zhì)粒并雙酶切進(jìn)行驗證，對陽性重組質(zhì)粒進(jìn)行測序。（剩余4368字）