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[摘要]目的探討鼻咽癌中EB病毒(EBV)對微管相關(guān)蛋白9([STBX]MAP9)基因表達(dá)的調(diào)控機(jī)制。方法應(yīng)用Western blot和實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qRTPCR)方法,檢測EBV陰性和EBV陽性鼻咽癌細(xì)胞系中MAP9的蛋白和mRNA表達(dá);軟件預(yù)測[STBX]MAP9基因甲基化島,采用甲基化特異性PCR(MSP)和亞硫酸氫鹽基因組測序(BGS)技術(shù)檢測[STBX]MAP9啟動子區(qū)甲基化情況;采用DNA甲基轉(zhuǎn)移酶抑制劑5氮雜2′脫氧胞苷(5AzacdR)處理EBV陽性鼻咽癌細(xì)胞系C6661,減少DNA的甲基化,檢測經(jīng)處理后細(xì)胞中[STBX]MAP9基因表達(dá)情況;選取EBV陰性鼻咽癌細(xì)胞系HONE和CNE1,建立穩(wěn)定表達(dá)外源性EBV潛伏膜蛋白1(LMP1)的細(xì)胞模型,將其命名為HONELMP1和CNE1LMP1,使用Western blot法檢測兩種細(xì)胞相較于對照組細(xì)胞HONELMP1NC和CNE1LMP1NC的極光激酶A(Aurora A)和MAP9蛋白表達(dá)情況。(剩余14341字)
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EBV抑制鼻咽癌細(xì)胞系中MAP9表達(dá)的機(jī)制
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