款冬花多糖通過調(diào)控miR-4282表達(dá)抑制宮頸癌細(xì)胞增殖、遷移侵襲的機(jī)制研究

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〔摘要〕 目的 探討款冬花多糖通過調(diào)控miR-4282表達(dá)抑制宮頸癌細(xì)胞增殖、遷移侵襲的機(jī)制。方法 體外培養(yǎng)人宮頸癌細(xì)胞株HeLa和C-33A并以10、20、40、80、120 mg·L-1的款冬花多糖處理，然后通過CCK-8實(shí)驗(yàn)測定各組細(xì)胞存活率并篩選款冬花多糖最佳作用濃度。將HeLa和C-33A細(xì)胞隨機(jī)分為對(duì)照組、5-氟尿嘧啶（5-fluorouracil， 5-FU）組、款冬花多糖組、miR-4282 mimics組、陰性對(duì)照組、款冬花多糖+miR-4282 inhibitor組，分組處理后通過RT-PCR檢測各組細(xì)胞miR-4282表達(dá)；通過CCK-8實(shí)驗(yàn)、EDU實(shí)驗(yàn)、流式細(xì)胞實(shí)驗(yàn)分別檢測各組細(xì)胞增殖、凋亡；通過劃痕實(shí)驗(yàn)、Transwell實(shí)驗(yàn)檢測各組細(xì)胞遷移、侵襲情況；通過Western blot法檢測各組細(xì)胞增殖相關(guān)蛋白（Cyclin D1）、凋亡相關(guān)蛋白[B淋巴細(xì)胞瘤-2（B-cell lymphoma-2， Bcl-2）、Bcl-2關(guān)聯(lián)X蛋白（B-cell lymphoma-2 related X protein， Bax）]、上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化相關(guān)蛋白[Vimentin、基質(zhì)金屬蛋白酶2（matrix metallo-proteinases 2， MMP-2）、E-cadherin]表達(dá)。（剩余14641字）