沙蔥螢葉甲GdHsp70-2 GdHsp70-3的克隆鑒定與表達(dá)譜分析

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摘要：為明確沙蔥螢葉甲Galeruca daurica熱激蛋白70 （Heat shock protein 70，Hsp70）基因的序列結(jié)構(gòu)及其系統(tǒng)進(jìn)化關(guān)系，本研究通過(guò)PCR技術(shù)克隆沙蔥螢葉甲Hsp70基因cDNA全長(zhǎng)序列與基因組序列，并進(jìn)行生物信息學(xué)與表達(dá)譜分析。結(jié)果顯示，克隆獲得了沙蔥螢葉甲2條Hsp70基因GdHsp70-2（GenBank登錄號(hào)：MZ853083）和GdHsp70-3（Genbank登錄號(hào)：OK585088），基因全長(zhǎng)分別為2 410 bp和2 242 bp，各自編碼657和646個(gè)氨基酸，均含有3個(gè)保守的HSP70家族特征序列，預(yù)測(cè)蛋白三維結(jié)構(gòu)均由N-端ATPase功能域和C-端底物結(jié)合功能域所組成；系統(tǒng)發(fā)育分析表明GdHSP70-2，GdHSP70-3分別與松墨天牛（Monochamus alternatus）MaltHSC70-1、玉米根螢葉甲（Diabrotica virgifera virgifera） DvirHSP70-2的親緣關(guān)系最近；基因組DNA克隆獲得GdHsp70-2的兩段內(nèi)含子序列，GdHsp70-3則不含有內(nèi)含子；表達(dá)譜分析結(jié)果表明GdHsp70-2，GdHsp70-3均在蛹期的表達(dá)量最高，在成蟲(chóng)中分別在翅和足的表達(dá)量最高。（剩余19647字）