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[摘 要] 目的:建立反向DNA-pull down方法,驗(yàn)證目的蛋白與靶DNA的結(jié)合,為探究疾病發(fā)生發(fā)展的分子機(jī)制提供新的手段。方法:以小鼠骨髓來源巨噬細(xì)胞總cDNA為模板,通過PCR擴(kuò)增獲得轉(zhuǎn)錄因子PU.1 -ETS結(jié)構(gòu)域編碼序列,通過酶切連接的方式連入表達(dá)質(zhì)粒pET28a,轉(zhuǎn)化至大腸桿菌BL21(DE3)誘導(dǎo)蛋白異源表達(dá)。(剩余9680字)
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反向DNA-pulldown方法的建立
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