脫氧膽酸通過ROS/NF-κB通路對Barrett食管細(xì)胞氧化應(yīng)激的影響

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摘要：目的  探討脫氧膽酸（DCA）對人BAR-T細(xì)胞氧化應(yīng)激的影響及機(jī)制。方法  體外培養(yǎng)人Barrett上皮細(xì)胞株BAR-T，采用不同濃度的DCA（100、200、300 μmol/L）和不同作用時間（30 min、60 min、3 h、6 h）干預(yù)BAR-T細(xì)胞。采用Real-time PCR法和Western blotting法檢測環(huán)氧酶-2（COX-2）的mRNA和蛋白表達(dá)；采用顯微鏡觀察和流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞內(nèi)活性氧（reactive oxygen species，ROS）含量，并與200 μmol/L DCA+ 5 mmol/L ROS清除劑 N-乙酰半胱胺酸（NAC）組進(jìn)行比較；采用細(xì)胞免疫熒光法檢測細(xì)胞p65蛋白入核情況，并與200 μmol/L DCA+100 μmol/L NF-κB通路抑制劑吡咯烷二硫代甲酸銨（PDTC）組進(jìn)行比較。（剩余13411字）