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一種農(nóng)桿菌介導(dǎo)的糜子高效遺傳轉(zhuǎn)化方法

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摘  要:糜子(Panicum miliaceum L.)是我國(guó)傳統(tǒng)的糧食作物,截至目前,針對(duì)糜子遺傳轉(zhuǎn)化方法的研究仍較少,本研究旨在建立農(nóng)桿菌介導(dǎo)的糜子高效遺傳轉(zhuǎn)化方法。以糜子品種冀黍5號(hào)的成熟種子為外植體,在CIM和MSD誘導(dǎo)培養(yǎng)基上分別誘導(dǎo)糜子的胚性愈傷,以其作為轉(zhuǎn)化受體材料,用含植物表達(dá)載體的農(nóng)桿菌侵染60 min并共培養(yǎng)6 d,轉(zhuǎn)接至含0.025 g/L潮霉素的篩選培養(yǎng)基上篩選出抗性愈傷,接著在含0.015 g/L潮霉素的分化培養(yǎng)基上分化,最后在含0.015 g/L潮霉素的生根培養(yǎng)基上生根成苗,用載體特異性引物對(duì)再生植株進(jìn)行PCR檢測(cè),鑒定其是否為陽(yáng)性轉(zhuǎn)基因植株。(剩余14435字)

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