應(yīng)用二次PCR檢測草莓炭疽病菌

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摘要：開發(fā)了一種基于PCR的草莓炭疽病致病菌暹羅炭疽菌（Colletotrichum sisamense）檢測方法。通過分析暹羅炭疽菌及24種真菌的ITS區(qū)序列，設(shè)計(jì)了1條反向特異引物CsiaR，結(jié)合引物CgInt可僅從暹羅炭疽菌中擴(kuò)出約 400 bp 片段。對不同濃度暹羅炭疽菌DNA溶液進(jìn)行檢測，第1輪和第2輪PCR的最低檢出限分別為50 pg/μL和 5 fg/μL；對接種不同濃度暹羅炭疽菌分生孢子懸浮液的草莓樣本（接種48 h，癥狀未出現(xiàn)）進(jìn)行檢測，低于1.0×104個(gè)孢子/mL的處理無法檢出；對田間隨機(jī)采集的草莓樣本檢測時(shí)，PCR檢測陽性的樣本（含有癥狀和無癥狀）中均可分離到暹羅炭疽菌。（剩余10508字）