基于OPG/RANK/RANKL信號(hào)通路探究益腎健骨顆粒對(duì)絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松大鼠BMSCs成骨分化的影響

〔摘要〕 目的 探討益腎健骨顆粒對(duì)絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（bone marrow mesenchymal stem cells， BMSCs）成骨分化的影響及其作用機(jī)制。方法 給予大鼠分別灌胃益腎健骨顆粒、生理鹽水1周，制備含藥血清及正常血清。采用背側(cè)雙切口切除雙側(cè)卵巢建立絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松模型，分離并培養(yǎng)大鼠BMSCs，流式細(xì)胞術(shù)鑒定BMSCs，將BMSCs細(xì)胞隨機(jī)分為對(duì)照組（N組）、含藥血清組（J組）、含藥血清+si-NC組（J+C組）、含藥血清+si-OPG組（J+O組），按組進(jìn)行相應(yīng)處理，對(duì)各組BMSCs進(jìn)行誘導(dǎo)成骨分化，堿性磷酸酶（alkaline phosphatase， ALP）染色與茜素紅S染色法檢測(cè)ALP活性及礦化結(jié)節(jié)數(shù)，實(shí)時(shí)熒光定量PCR（real-time PCR，RT-qPCR）檢測(cè)ALP、Runt相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子2（Runt-associated transcription factor 2， Runx2）、骨鈣素（osteocalcin， OCN）mRNA表達(dá)，Western blot檢測(cè)骨保護(hù)素（osteoprotegerin， OPG）、核因子κB受體活化因子（receptor activator of nuclear factor kappa B， RANK）、RANK配體（RANK ligand， RANKL）蛋白表達(dá)。（剩余12478字）