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[摘要] 目的 探討檳榔提取物(ANE) 對(duì)人口腔上皮細(xì)胞的生物學(xué)功能影響。方法 本研究首先分析了梯度濃度ANE 下對(duì)人口腔角質(zhì)細(xì)胞(HOK) 增殖的影響;采用第二代RNA測(cè)序分析對(duì)照組與ANE 干預(yù)組HOK細(xì)胞的差異表達(dá)基因。隨后,流式細(xì)胞術(shù)用于檢測(cè)HOK細(xì)胞周期和凋亡;β-半乳糖苷酶(β-Gal) 染色試劑盒用于檢測(cè)細(xì)胞衰老;免疫熒光實(shí)驗(yàn)檢測(cè)HOK細(xì)胞中Ki67 和γH2AX蛋白的表達(dá);實(shí)時(shí)聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR) 用于檢測(cè)衰老相關(guān)表型基因白細(xì)胞介素(IL) -6、基質(zhì)金屬蛋白酶-2 (MMP2) 和TGFB1 表達(dá);免疫印跡用于檢測(cè)自噬相關(guān)蛋白(LC3-Ⅰ/Ⅱ 和p62) 和上皮間充質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT) 相關(guān)蛋白(SMAD2、p-SMAD2、E-Cadherin 和Vimentin)的表達(dá);酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)用于檢測(cè)HOK細(xì)胞外分泌蛋白TGFB1 表達(dá)。(剩余19321字)
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檳榔提取物對(duì)口腔上皮細(xì)胞生物功能影響的研究
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