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綿羊DFAT細(xì)胞特性及其誘導(dǎo)成脂分化過程中關(guān)鍵基因的表達(dá)

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摘 要 為了揭示綿羊DFAT細(xì)胞特性及其誘導(dǎo)成脂分化過程中關(guān)鍵基因的表達(dá),以實(shí)驗(yàn)室前期獲得的不同年齡阿勒泰羊尾部脂肪組織DFAT細(xì)胞為試驗(yàn)材料,對(duì)其細(xì)胞增殖能力、誘導(dǎo)成脂分化能力及其誘導(dǎo)成脂分化過程中關(guān)鍵基因的表達(dá)規(guī)律進(jìn)行深入研究。結(jié)果表明:來源于6、12和24月齡阿勒泰羊尾部脂肪組織的第3代DFAT細(xì)胞生長(zhǎng)曲線均呈典型的“S”形曲線,細(xì)胞增殖速度未見明顯差異;細(xì)胞連續(xù)傳代20代后仍保持良好的細(xì)胞形態(tài)和增殖速度,且不同代次細(xì)胞之間未見明顯差異;采用誘導(dǎo)和維持培養(yǎng)交替進(jìn)行的誘導(dǎo)成脂分化體系(體系Ⅲ),其誘導(dǎo)成脂分化效率極顯著優(yōu)于持續(xù)誘導(dǎo)分化體系(體系Ⅰ)和先誘導(dǎo)然后維持培養(yǎng)的誘導(dǎo)分化體系(體系Ⅱ) (P<0.01);不同年齡來源DFAT細(xì)胞誘導(dǎo)成脂分化能力差異不顯著(P>0.05);在DFAT細(xì)胞誘導(dǎo)成脂分化過程中,啟動(dòng)成脂分化的關(guān)鍵基因PPARγ和C/EBPα,脂質(zhì)沉積關(guān)鍵基因ADIPOQ、 FSP27、 FABP4和LPL,脂質(zhì)分解關(guān)鍵基因HSL 、ATGL和Leptin,以及前體脂肪細(xì)胞標(biāo)志性基因 CD142和 ICAM1均先出現(xiàn)極顯著上調(diào)(P<0.01),然后又出現(xiàn)極顯著下調(diào)(P<0.01),但脂肪細(xì)胞祖細(xì)胞標(biāo)志性基因 DPP4的表達(dá)量在誘導(dǎo)分化的第2天以后出現(xiàn)極顯著下調(diào)(P<0.01),且在此后的整個(gè)誘導(dǎo)分化期間均保持極低的表達(dá)水平。(剩余15944字)

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