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應(yīng)用不同DNA 提取試劑盒對(duì)溺死硅藻檢驗(yàn)后續(xù)分析的影響

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【摘 要】目的:研究不同DNA提取試劑盒對(duì)水中溺死尸體器官組織中硅藻的分子生物學(xué)檢測(cè)后續(xù)分析的影響。方法:本研究選取經(jīng)案件偵查、病理學(xué)檢驗(yàn),并在電子顯微鏡下進(jìn)行硅藻形態(tài)學(xué)檢驗(yàn)確認(rèn)為溺水死亡的組織及水樣,本研究選擇了4種不同原理的DNA提取試劑盒,從該死者的肺、肝、脾、腎組織及水樣中提取DNA。首先,本研究測(cè)量了4 種試劑盒提取產(chǎn)品的核酸含量和測(cè)定260 nm和280 nm下吸光度(absorbance,A)值,以評(píng)估DNA提取的質(zhì)量;其次,使用真核18S rDNA V4區(qū)域通用引物對(duì)提取的產(chǎn)物進(jìn)行高通量測(cè)序,以比較不同DNA提取試劑盒提取的硅藻種類和數(shù)量;第三,應(yīng)用硅藻特異性引物對(duì)不同的目的基因進(jìn)行聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(polymerase chain reaction,PCR)擴(kuò)增,以顯示不同試劑盒提取不同來(lái)源DNA的效果。(剩余14367字)

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